Новости Takara BIO: RT-qPCR без выделения РНК и qPCR с циклирующей пробой

Новости Takara BIO:

CellAmp™ Direct RT-qPCR Kits:
Наборы CellAmp™ Direct Probe RT-qPCR Kit (3736S/3736A) и CellAmp™ Direct TB Green™ RT-qPCR Kit (3735S/3735A) разработаны для проведения простой процедуры двухступенчатой ОТ-ПЦР в реальном времени непосредственно из различных клеток животных (например, адгезионных культур, суспензионных культур, первичных клеток, различных стволовых клеток, и iPS клеток) без необходимости выделять РНК. Наборы CellAmp™ дают возможность подготовить образцы матрицы из культивируемых клеток, завершить обратную транскрипцию и анализ экспрессии гена всего за 1,5 часа.
Технология, применяемая в наборах, позволяет эффективно удалить геномную ДНК. Это особенно важно в работе, при которой контаминация образцов геномной ДНК является проблемой, например при невозможности создать праймеры, перекрывающие два экзона, или при анализе генов с низкой экспрессией.
Наборы CellAmp™ Direct Lysis and RT set (3737S/3737A) содержат в составе лизирующий буфер, ДНКазу I, RT праймер и реагент для подготовки кДНК для анализа экспрессии гена с помощью двухступенчатой ОТ-ПЦР. Наборы эквиваленты описанным выше продуктам CellAmp™ Direct Probe RT-qPCR Kit (3736S/3736A), у них отсутствует qPCR реагент, чтобы при необходимости исследователи смогли использовать свою собственную смесь.

Преимущества

• CellAmp™ позволяет подготавливать матрицу без очистки РНК;

• Реакций занимает всего 1,5 часа, нет опасности деградации и искажения результатов;

• В случае, если контаминация геномной ДНК является проблемой, для удаления геномной ДНК применяется обработка ДНКазой I;

• Инактивация ДНКазы I происходит без термической обработки, что значительно экономит время. Процесс совместим с атоматизированными системами.

  
CycleavePCR Core Kit

Набор CycleavePCR Core Kit разработан специально для проведения ПЦР-РВ с технологией циклирующей пробы (Cycling probe detection). Технология циклирующей пробы - это высокочувствительный метод детекции, основанный на комбинировании химерной пробы, состоящей из РНК и ДНК, и РНКазы Н. Специфическая последовательность таргетного гена, которую необходимо амплифицировать, можно эффективно определить в процессе или после амплификации. Пока проба остается интактной флуоресцентный сигнал, не появляется из-за присутствия гасителя. Когда проба формирует гибрид с комплиментарной последовательностью амплифицированного продукта, РНКаза Н специфически режет область РНК в пробе, что приводит к появлению активного флуоресцентного сигнала. Путем измерения интенсивности испускаемой флуоресценции определяется количество амплифицированного продукта. Зонд, не полностью соответствующий области таргетной последовательности, не режется РНКазой Н, таким образом, технология циклирующей пробы позволяет проводить высокоспецифичную детекцию даже однонуклеотидных полиморфизмов (SNP).